张建明1，黄野能1，高博1，杨坤宇2，赵书艺3，王宇平1

　　1.福建国际旅行卫生保健中心，福建 福州 350001；2.厦门国际旅行卫生保健中心；3.福建医科大学

　　摘要：目的  研究分析福建口岸输入登革I型病毒E基因序列，为登革热诊断的分子溯源提供参考。方法 收集2012-2013年福建口岸截获的7例入境Ⅰ型登革热病例资料及血清标本，用C6/36细胞培养分离病毒，提取病毒RNA，用RT-nested-PCR扩增包含E基因全长的核酸片段，扩增产物经纯化、测序，用生物学软件进行DNA序列比对分析。结果 用C6/36细胞从7例登革热病例血清中成功分离出7株登革病毒株，经RT-nested-PCR证实均为DENV-Ⅰ型，构建E基因全长进化树分析发现，分离株与新加坡、越南和菲律宾等地的病毒株同源性最高，与病例入境时进行的流行病学调查资料完全吻合。结论 从分子水平证明登革热病例血清中分离到的毒株为DENV-Ⅰ型病毒，结合流行病学调查资料，证实均为输入性感染病例，最有可能来源于东南亚一带。

　　关键词：登革病毒；E基因；序列分析；系统进化树

　　中图分类号：R446.6  文献标识码：B

　　Study on E gene sequence of dengue virus type I at Fujianport

　　ZHANG Jian-ming*， HUANG Ye-neng， GAO Bo， YANG Kun-yu， ZHAOShu-yi， WANG Yu-ping

　　*Fujian International Travel Healthcare Center， Fuzhou， Fujian350001， China

　　Abstract： Objective  To study E gene sequence of denguevirus type I at Fujian port, and to lay a foundation for moleculardiagnosis of dengue fever. Methods  Epidemiological data andserum samples were collected and viruses were isolated in C6/36cells. The viral RNA was extracted, and amplified to DNA fragmentcontaining the full-length E gene by RT-nested-PCR. The amplifiedproduct was purified， sequenced and analyzed with biologicalsoftware. Results  Seven strains of dengue virus isolates frompatients at Fujian port were shown to be DENV-I. The full length Egene （1485 bp） was amplified successfully. The phylogenetic treeshowed more homology with Singapore， Vietnam and Philippines virusstrains， consistent with the source of entry patients. Conclusion A total of 7 cases were imported dengue fever cases.Southeast Asia was the most likely source.

　　Key words： Dengue virus； E gene； Sequence analysis； Phylogenetictree

　　《中国国境卫生检疫杂志》2014年4期