摘  要 以异烟酸-巴比妥酸作为显色剂代替异烟酸-吡唑啉酮测定杏仁油中的氰化物。通过实验，校正曲线在0～2μg范围内，线性关系良好，回归方程Y=0.4937X-0.OO05，相关系数r=0.9991，最低检测浓度为0.1mg／kg，加标回收率为92.4%。该方法克服了苯甲醛与吡唑啉酮反应产生白色混浊的干扰，可用于杏仁油中氰化物的测定。
    关键词  氰化物  杏仁油  测定

   山杏仁中含有氰化物，成人致死量平均50粒。在制取杏仁油过程中，氰化物不可避免地进入杏仁油中。因此杏仁油生产过程中，比较关键的一环是去除氰化物，使其在安全范围内。目前，关于杏仁油提取和脂肪酸组成方面的研究较多，但还没有建立杏仁油国家标准或行业标准，对杏仁油中氰化物含量的研究也未见报道。氰化物的检测方法在GB/T5009.48-2003《蒸馏酒及配置酒卫生标准的分析方法》和GB/T5009.36-2003《粮食卫生标准的分析方法》中均采用异烟酸-吡唑啉酮分光光度法[1,2]。笔者在实际测量杏仁油中氰化物时发现，在加入显色剂后出现不同程度的白色混浊，严重干扰测定效果。参考GB/T5750.5-2006《生活饮用水标准检验方法无机非金属指标》氰化物测定方法第二法，笔者将显色剂更换为异烟酸-巴比妥酸，消除了混浊的干扰[3]。
    1 材料与方法
    1.1 原理
   试样中氰化物经水蒸气蒸馏后被碱溶液吸收，与氯胺T生成氯化氰，然后与异烟酸-巴比妥酸反应生成紫蓝色化合物，于600nm波长处比色定量。
    1.2 仪器
    水蒸汽蒸馏装置；25ml具塞比色管；721型分光光度计。
    1.3 试剂
   氰化物标准使用液(1μg／ml)、酒石酸、100g／L乙酸锌溶液、40g／L氢氧化钠溶液、12g／L氢氧化钠溶液、乙酸溶液(3+97)、lg／L酚酞指示剂、136g／L磷酸二氢钾溶液、10g／L氯胺T溶液(现用现配)。
   异烟酸—巴比妥酸溶液：称取2.0g异烟酸和1.0g巴比妥酸，溶于60～70℃的12g／L氢氧化钠溶液100ml中。
    以上试剂均为分析纯，参照GB/T 5750.5-2006 《生活饮用水标准检验方法无机非金属指标》进行配制。
    1.4 方法
   直接称量杏仁油试样10g于蒸馏瓶中，向其中加入100g／L乙酸锌溶液20ml，再加入酒石酸1～2g,立即通入水蒸气进行蒸馏，用装有10ml40g／L氢氧化钠溶液的100ml容量瓶，收集馏液近100ml，取下容量瓶，加水至刻度。
   吸取l0ml蒸馏吸收液，置于25ml具塞比色管中。另取25ml具塞比色管10支，分别加入氰化物标准使用液0ml、0.10ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml、2.50ml，各加12g／L氢氧化钠溶液至l0ml。向试样及标准管中各加l滴酚酞指示剂，用乙酸溶液调至红色刚好消失。向各管中各加入3ml磷酸二氢钾溶液和0.25ml氯胺T溶液，混匀。放置2min后，向各管中加入5ml异烟酸-巴比妥酸溶液。25℃下显色15min，于波长600nm下，用3cm比色皿，以零管调节零点，测定试样和标准系列溶液的吸光度。绘制校正曲线，在曲线上查出试样管中氰化物的含量。
    计算公式
            A×100×1000
P （mg／L)= 
            m×10×1000
A—试样氰化物含量(μg)
m—试样质量（g）
    2 结果
    2.1 校正曲线和回归方程
   校正曲线在0～2μg范围内，线性关系良好，回归方程Y=0.4937X-0.OO05，相关系数r=0.9991。最低检测量为0.1μg，若取10g试样测定，最低检测浓度为0.1mg／kg。
2.2 方法的精密度和准确度试验 
    分别做0.1、0.5、1.0 mg／L3种浓度的加标回收试验，每种浓度平行测定5次，结果见表l。
    表1. 精密度和准确度测定结果

    3 讨论
   3.1杏仁油中含有苯甲醛，苯甲醛又名苦杏仁油，普通品为无色至淡黄色液体，沸点179℃，有苦杏仁味，微溶于水，能与水蒸气一同挥发。正是因为它能与水蒸气一同挥发的特性，在试样处理时，无论采用直接蒸馏法还是水蒸气蒸馏法都无法消除干扰。另外杏仁中苦杏仁苷是由戊胆二糖、氢氰酸、苯甲醛组成，它在水解产生氢氰酸的同时，也产生苯甲醛。实验证明，只有苯甲醛与吡唑啉酮产生白色浑浊，而且浑浊只在中性和酸性条件下产生。异烟酸-吡唑啉酮是测定氰化物的最终显色剂，苯甲醛与吡唑啉酮产生白色浑浊时，一方面溶液浑浊影响比色，另一方面也影响了氯化氰与异烟酸-吡唑啉酮生成蓝色，因此异烟酸一吡唑啉酮分光光度法不适用于测定杏仁油中氰化物。测定氰化物的化学方法现在常用的主要有异烟酸-吡唑啉酮法、砒啶-吡唑啉酮法、异烟酸-巴比妥酸法等。吡唑啉酮用巴比妥酸替换，取得满意的实验结果，显色时间也由40min缩短到15min。这在徐向阳等的《杏仁露氰化物测定方法的研究》中有过报道[4]。
    3.2当氰化物以HCN存在时易挥发，从用乙酸溶液调完pH值后，每一步都要迅速操作，并随时盖好塞子。
    3.3氯胺T含量的改变，常常是导致实验失败的的原因，氯胺T易受阳光和空气作用而逐渐分解失效，因此必须储存在密封的容器里，并放在阴凉干燥处，在使用前现配，当配置后出现混浊沉淀物时，不宜再用。在显色阶段，用氯胺T氧化为氯化氰的过程，由于氯化氰的沸点很低（13℃），所以混匀动作不宜过猛。
    3.4蒸馏操作过程中，控制蒸馏速度为2～4ml/min，过快易使氰化物损失，同时应控制好吸收液的碱浓度，冷凝管的下端要插入吸收液的液面下，使吸收完全。馏出液在蒸馏完后不能呈酸性，可在吸收液中加2滴酚酞指示剂，使其在吸收完后依然保持红色。而在GB/T5009.36中以10g/L的氢氧化钠溶液作吸收液，满足不了要求，应提高吸收液碱含量或增加吸收液用量。
   （本文实验过程中得到朝阳市疾病预防控制中心徐向阳的大力帮助，同时也得到了朝阳市产品质量监督检验所李玉红和武冬梅的帮助，在此一并表示感谢！）

    参考文献
    [1] GB/T 5009.36-2003，粮食卫生标准的分析方法[S]．
    [2] GB/T 5009.48-2003，蒸馏酒及配制酒卫生标准的分析方法[S]．
    [3] GB/T 5750.5-2006，生活饮用水标准检验方法无机非金属指标[S]．
    [4]徐向阳，翟凤兰.杏仁露中氰化物测定方法的研究[J].中国食品卫生杂志，2002，14(6):20-22.

    （作者单位：辽宁省朝阳市产品质量监督检验所  辽宁省北票市卫生防疫站）